pH緩沖液是實驗中常用的試劑,其調(diào)制方式多樣且需要一定的精確度。下面將介紹幾種常見的pH緩沖液的調(diào)制方式:
一、磷酸鹽緩沖液(PB)
1. 材料準(zhǔn)備:通常使用磷酸二氫鈉(NaH?PO?)和磷酸氫二鈉(Na?HPO?)作為主要原料,此外還需去離子水以溶解試劑。
2. 配置方法:按照特定比例稱取適量的NaH?PO?和Na?HPO?,分別溶解于少量去離子水中。例如,要配置一定體積的PB緩沖液,可先計算出所需NaH?PO?和Na?HPO?的質(zhì)量,然后分別稱量并溶解。
3. 混合與調(diào)整:將兩種溶液混合在一起,此時溶液的pH值可能并不準(zhǔn)確。使用pH計測量混合溶液的pH值,并根據(jù)需要加入少量的酸(如HCl)或堿(如NaOH)來調(diào)整pH值至所需范圍。例如,如果需要pH值為7.4的PB緩沖液,而初始混合溶液的pH值低于7.4,則可以緩慢加入NaOH溶液直至達到所需pH值;反之,如果pH值高于7.4,則加入HCl溶液進行調(diào)整。
4. 定容與儲存:調(diào)整好pH值后,將溶液轉(zhuǎn)移至容量瓶中,用去離子水定容至刻度線,搖勻。最后,將配置好的PB緩沖液儲存于適當(dāng)?shù)娜萜髦?,避免陽光直射和高溫環(huán)境。
二、三氯醋酸緩沖液(TCA)
1. 材料準(zhǔn)備:主要原料為三氯乙酸(TCA),以及去離子水用于溶解。
2. 配置方法:在適量的去離子水中加入一定量的TCA。例如,若要配置特定濃度的TCA緩沖液,可根據(jù)所需濃度計算出TCA的質(zhì)量或體積,然后加入到相應(yīng)體積的去離子水中。
3. pH調(diào)整:使用pH計測量溶液的pH值,并通過添加無水HCl或NaOH來調(diào)節(jié)pH值至所需范圍。由于TCA本身具有一定的酸性,因此通常需要加入堿來提高pH值。
4. 定容與儲存:調(diào)整好pH值后,將溶液轉(zhuǎn)移至容量瓶中,用去離子水定容至刻度線,搖勻。儲存時需注意避光和保持適宜的溫度。
三、TRIS緩沖液
1. 材料準(zhǔn)備:主要使用Tris-Base(三羥甲基氨基甲烷)作為原料,以及去離子水和鹽酸(HCl)用于調(diào)節(jié)pH值。
2. 配置方法:在適量的去離子水中溶解適量的Tris-Base。例如,若要配置一定體積的TRIS緩沖液,可先計算出所需Tris-Base的質(zhì)量,然后稱量并溶解于去離子水中。
3. pH調(diào)整:使用pH計測量溶液的pH值,并緩慢加入0.1M HCl溶液來降低pH值。當(dāng)pH值接近所需值時,應(yīng)減慢加入HCl的速度,并仔細監(jiān)測pH值的變化。若不小心加入過量的HCl導(dǎo)致pH值過低,可加入適量的NaOH溶液進行中和。
4. 定容與儲存:調(diào)整好pH值后,將溶液轉(zhuǎn)移至容量瓶中,用去離子水定容至刻度線,搖勻。最后將配置好的TRIS緩沖液儲存于適當(dāng)?shù)娜萜髦?,避免陽光直射和高溫環(huán)境。
需要注意的是,不同的實驗需求可能需要不同種類的緩沖液以及特定的pH值范圍。因此,在調(diào)制pH緩沖液時,應(yīng)根據(jù)具體實驗要求選擇合適的調(diào)制方式,并嚴格控制各種條件以確保緩沖液的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。同時,操作過程中應(yīng)注意安全規(guī)范以避免發(fā)生意外事故。